ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一種常見的免疫學檢測技術，可用于檢測血清、唾液、尿液等生物樣本中的蛋白質、抗體等分子。該技術基于特異性抗原與抗體的結合反應，利用酶標記的二抗或底物進行檢測。ELISA有直接ELISA、間接ELISA、競爭ELISA等不同類型，具有高靈敏度、特異性和可重復性，廣泛應用于醫(yī)學、生命科學、環(huán)境監(jiān)測等領域。

那ELISA實驗結果不如預期是什么原因呢

（1）低信號/陰性結果：

    ? 樣品處理問題：可能存在樣品稀釋不當、保存不當、存在干擾物質等。

    ? 抗體質量問題：使用的抗體可能與目標物質結合不充分或不特異。

    ? 實驗操作問題：可能存在洗滌不徹底、孵育時間過短等實驗操作不準確的問題。

 

（2）高背景/假陽性結果：

    ? 阻斷問題：阻斷步驟不充分，導致非特異性結合。

    ? 抗體交叉反應：使用的抗體可能與其他非目標物質發(fā)生交叉反應。

    ? 樣品污染：存在非特異性的樣品污染，如細胞碎片、大量蛋白質等。

 
（3）結果變異性：

    ? 實驗條件問題：實驗條件（如溫度、濕度、孵育時間）的不一致性可能導致結果的變異性。

    ? 實驗重復性問題：可能存在實驗操作的差異或者試劑批次的差異，影響結果的一致性。

 
（4）非線性結果：

    ? 標準曲線問題：標準曲線的制備可能存在誤差，導致濃度計算不準確。

    ? 高濃度樣品稀釋問題：如果使用高濃度的樣品進行稀釋，稀釋比例選擇不當可能導致非線性結果。