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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。 |
| 品牌 | 莼試 |
| 貨號 | CSX4162 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 詳見說明書 |
| 細胞形態(tài) | CM1-1培養(yǎng)液中，貼壁，上皮樣細胞，不規(guī)則形，成片生長 |
| 是否是腫瘤細胞 | 是 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
| 物種來源 | 詳見說明書 |
| 包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
| 純度 | 詳見說明書% |
| 是否進口 | 是 |
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞培養(yǎng)來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 類型 | 佛號 |
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞培養(yǎng) | 貼壁生長 | CSX4162 |
資源名稱 腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞
種屬:AAV-293
類型:貼壁生長
形態(tài):CM1-1培養(yǎng)液中，貼壁，上皮樣細胞，不規(guī)則形，成片生長
分離基物使用AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK293細胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞
提供形式:復(fù)蘇形式：T25培養(yǎng)瓶1瓶；或者凍存形式：2ml凍存管2支，干冰費另計。
安全等級:1
模式菌株:未知
應(yīng)用領(lǐng)域跟HEK293細胞一樣，AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因，當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒，pAAV-RC， 和E1缺失助質(zhì)粒)時，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。
培養(yǎng)方法
傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約1min取出。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；
生長條件:37℃，5%CO2，CM1-1培養(yǎng)液。CM1-1培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。
存儲條件:凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
培養(yǎng)操作步驟：
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞培養(yǎng)產(chǎn)品僅用于科研1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMYB水合硫酸鐵(> 99%,BR)質(zhì)量規(guī)格：> 99%,BRIron(III) sulfate, hydrate
CD3D Others Human 人 CD3d / CD3 delta 人細胞裂解液 (陽性對照) 沒食子酸甲酯(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCMethyl gallate
C57BL/6小鼠神經(jīng)干細胞 Neural stem cells in C57BL/6 mice麥芽糖;淀粉糖質(zhì)量規(guī)格：>92%,一水物D-(+)-Maltose monohydrate
SW1353細胞，人細胞 島青霉 人胚胎;WI-38ONX-0914 (PR-957)質(zhì)量規(guī)格：>98%,immunoproteasome抑制劑ONX0914;PR957
SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細胞) 5×106cells/瓶×2N-壬酰基-N-甲基葡萄糖胺(MEGA9)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRN-Nonanoyl-N-methylglucamine
CHI3L2 Others Human 人 CHI3L2 / YKL-39 人細胞裂解液 (陽性對照) 比枯枯靈,右旋荷包牡丹堿質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR(+)-Bicuculline
小鼠細胞;P3/NSI/1-Ag4-1比枯枯靈,右旋荷包牡丹堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品(+)-Bicuculline
CHI3L1 Others Mouse 小鼠 CHI3L1 / YKL40 / gp39 人細胞裂解液 (陽性對照) 石杉堿甲質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR(?)-Huperzine A
Caco-2 人結(jié)直腸腺癌細胞表沒食子兒茶素質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BREGC
A498-EGFP-puro人細胞 Human renal cell carcinoma A498-EGFP-puro cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin泛酸鈣,維生素B5質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法含量測定用D-Calcium Panthotenate
HK3 Others Human 人 Hexokinase-3 / HK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 橙黃Ⅱshēng huà shì jì容量：2～8°C250克
人細胞;MGC-803膽甾醇氧化酶(+4℃) CHOLqSTqROL OXIDcSq 908-76-6
Tca-8113細胞，舌鱗癌細胞 人低分化細胞,BGC-823細胞 盤羊皮膚細胞;ASHS2乙酸 Iodoacetic acid (≥99%, powder or flak... 64-69-7 25G 通用試劑
小鼠*癌細胞(B類);Pan02β-鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：RT10克
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) DNAseⅠ,Bovine 25mg/100mg Sigma分裝
腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞培養(yǎng)人胚肺二倍體細胞;2BS腐霉利(標(biāo)準(zhǔn)品)Procymidon質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
SRGN Others Human 人 Serglycin / SRGN 人細胞裂解液 (陽性對照) 吡蚜酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Pymetrozin質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
HEC-1-B 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞敵稗(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)Propanil質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%
ACHN人腎細胞腺癌細胞 ACHN human renal cell carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS抑霉唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)Imazalil solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2%
TNF Protein Mouse 重組小鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白稻瘟靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)Isoprothiolane solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2%
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
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