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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX4147 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
人二倍體細胞/人胚說明書冷凍保存細胞之方法:
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟:
資源名稱 人二倍體細胞/人胚說明書
種屬:2BS
形態(tài):成纖維細胞樣
模式菌株:未知
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
生長特性:貼壁生長
細胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:產(chǎn)品僅用于科研
是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程:
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人二倍體細胞/人胚說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
Caki-1細胞,人腎透明細胞癌細胞 綠猴猴脈絡膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞,RF/6A細胞 CL-0414PC-3M-IE8(人高轉(zhuǎn)移細胞株)5×106cells/瓶×2法羅培南鈉(標準品)質(zhì)量規(guī)格:標準品用于含量測定Faropenem
CRT(人神經(jīng)細胞) 5×106cells/瓶×2奧利司他質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%,BROrlistat(synthesis)
hMNC-PB-c pooledula-pure 人單核細胞,來自外周血,混合來源,超 人*微內(nèi)皮細胞HCMEC甲基立枯1(分析標準品,98%)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,98%Tolclofos-methyl
GBC-SD, 人細胞殺蟲單(標準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品Thiosultap di
ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照) 綠草定(標準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品Triclopyr
CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株)5×106cells/瓶×2毒胡蘿卜素(>95% (HPLC),BC)質(zhì)量規(guī)格:>95% (HPLC),BCThapsigargin, from Thapsia garganica
PANC-1, 人*癌細胞 細胞,Hep G2細胞 U-937(組織細胞瘤細胞)硫黃素 T(>75%,BS)質(zhì)量規(guī)格:>75%,BSThioflavin T
小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3硫藤黃素(>95%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BCThiolutin from Streptomyces luteosporeus
LAMP1 Others Human 人 LAMP1 / CD107a 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫堇(>90%,BS)質(zhì)量規(guī)格:>90%,BSThionin
中國倉鼠卵巢細胞(亞系*);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6四丙基化銨(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)Tetrapropylammonium Iodide
TNF Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 TNF-alpha / TNFA / TNFSF1A / Cachectin 蛋白5-溴-2-脫氧胞苷5克
人臍帶平滑肌細胞 (HUVSMC)( 5×105 ) SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐藥細胞株 Human2,4-二羥基-6-甲基... 2,4-Dihydroxy-6-methylbenzoic acid,97% 480-64-8 250MG 通用試劑
人男性正常細胞;Hs68L-半胱安醋言醋鹽;(R)-2-安基-3-巰基炳醋言醋鹽 L-Cystqinq xy7nochloridq;L(+)-α-cMino-β-thiopropionic ccid xy7nochloridq;L(+)-cMino-α-Mqrccptopropionic ccid xy7nochloridq 7048-4-6
CD2 Others Rat 大鼠 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) 天青II曙紅100克
人輸尿管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL9000-1-5阿拉伯樹膠Arabic gum
人二倍體細胞/人胚說明書615小鼠株;Ca761 小鼠子宮成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL甘草酸Glycyrrhizic acid質(zhì)量規(guī)格:UV>98%,BR
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 Mouse甘草酸(標準品)Glycyrrhizic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
EPHA2 Others Mouse 小鼠 EPHA2 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘草酸單銨鹽(標準品)Glycyrrhizic acid ammonium salt質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1甘草酸單銨鹽Glycyrrhizic acid ammonium salt質(zhì)量規(guī)格:UV>97%,無水物,BR
HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘草酸二銨鹽(標準品)Diammonium Glycyrrhizate質(zhì)量規(guī)格:UV≥98%,標準品
收到人二倍體細胞/人胚說明書處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。