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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX3713 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | 上皮樣 膀 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 胱 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
人細胞(2014年9月新引進)(干細胞庫保藏)形態(tài)冷凍保存細胞之方法:
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟:
資源名稱 人細胞(2014年9月新引進)(干細胞庫保藏)形態(tài)
種屬:TCCSUP
類型:膀胱
形態(tài):上皮樣
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:EMEM (Invitrogen,11090081) 87 ml FBS (Biochrom, S4115) 10 ml Glutamax(invitrogen 35050) 1 ml Non-essential Amino Acids, 100 (Invitrogen, 11140) 1 ml Sodium Pyruvate 100 mM Solution(invitrogen 11360070) 1 ml 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
細胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:產(chǎn)品僅用于科研
是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程:
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是人細胞(2014年9月新引進)(干細胞庫保藏)形態(tài)的相關熱銷產(chǎn)品:
人口腔角質(zhì)細胞(HOK)( 5×105 ) NSC,大鼠神經(jīng)干細胞 Rattus9-(2-羥丙基-d6)腺嘌呤9-[2-(Hydroxypropyl-d6] Adenine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
猴腎細胞;Vero IgCD4(R)-9-(2-羥丙基)腺嘌呤(R)-9-[2-(Hydroxypropyl] Adenine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
FST Others Mouse 小鼠 Follistatin / FST 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-1酸甘油酸激酶3-Phosphoglyceric Phosphokinase質(zhì)量規(guī)格:1000u/mg,Sigma分裝
HPB-ALL(懸浮) T細胞1,5-二1酸-D-核酮糖/1,5二1酸核酮糖d-ribulose 1,5-diphosphate/RuDP質(zhì)量規(guī)格:90.0%,Sigma
769-P人腎細胞腺癌細胞 769-P human renal cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS酸性蛋白酶;蛋白酶來自佐氏曲霉Acidic Protease from Aspergillus 質(zhì)量規(guī)格:BR,50u/mg
OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )質(zhì)量規(guī)格:D,99.9%Dimethyl Sulfoxide-D6
CM-H053人細胞完全培養(yǎng)基100mL氘代DMSO-D6(10 g )質(zhì)量規(guī)格:D,99.8%+TMS 0.03%Dimethyl Sulfoxide-D6
DIRAS3 Others Human 人 ARHI / DIRAS3 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶K(進分)質(zhì)量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma分裝Proteinase K
人海馬星形膠質(zhì)細胞HA-h蛋白酶K(Sigma)質(zhì)量規(guī)格:≥30units/mg protein,sigma原裝Proteinase K
Hs 181.Tes細胞,正常人細胞 人癌細胞,HCC1937細胞 平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf胰凝乳蛋白酶抑制劑質(zhì)量規(guī)格:進分Chymostatin
人脂肪微內(nèi)皮細胞HAMEC抗壞血酸;維生素C質(zhì)量規(guī)格:AR;>99%Ascorbic acid;vitamin C
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素C(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Ascorbic acid;vitamin C
非洲綠猴腎細胞;VERO十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺質(zhì)量規(guī)格:AROctadecanamine
NCI-H157細胞,人非小細胞 小鼠細胞,S-180細胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL山梨酸質(zhì)量規(guī)格:AR,99%Sorbic acid
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細胞細胞) 5×106cells/瓶×2DL-薄荷醇質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品DL-Menthol
人細胞(2014年9月新引進)(干細胞庫保藏)形態(tài)HBE(人上皮樣細胞) 5×106cells/瓶×2 軟骨細胞培養(yǎng)基CM去噻唑基甲基 利托那韋Desthiazolylmethyl Ritonavir質(zhì)量規(guī)格:美國進口
腎動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)N-去甲基羅格列酮-d4N-Desmethyl Rosiglitazone-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口
RPRD1B Others Human 人 RPRD1B 人細胞裂解液 (陽性對照) 羅格列酮(鉀鹽)Rosiglitazone (potassium salt)質(zhì)量規(guī)格:美國進口
小鼠腹水瘤細胞;S-180羅格列酮鹽酸鹽rosiglitazone 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
HPAEC細胞,人肺動脈內(nèi)皮細胞 猴腎細胞系,BSC-1細胞 CL-0082F9(小鼠)5×106cells/瓶×25-羥基羅格列酮5-Hydroxy Rosiglitazone質(zhì)量規(guī)格:美國進口
收到人細胞(2014年9月新引進)(干細胞庫保藏)形態(tài)處理方法
產(chǎn)品僅用于科研1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。