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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CS-E01779 |
檢測限 | 用于測定血清,血漿及相關液體等樣本 |
數(shù)量 | 37 |
檢測方法 | 夾心法、競爭法、捕獲法等 |
標記物 | 血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等 |
樣本 | Rat nuclear transcription factor-κB /NFκB ELISA Kit |
應用 | 酶標板,試劑,標準品等 |
試劑準備:
1. 大鼠核轉錄因子κB (NFκB)elisa檢測試劑盒說明書使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
大鼠核轉錄因子κB (NFκB)elisa檢測試劑盒說明書 | Rat nuclear transcription factor-κB /NFκB ELISA Kit | 48T/96T |
大鼠核轉錄因子κB (NFκB)elisa檢測試劑盒說明書 Rat nuclear transcription factor-κB /NFκB ELISA Kit
【實驗用途】核轉錄因子κB (nuclear transcription factor-κB,NF-κB),NF-kB,是一種蛋白質分子,其結構為一種體內(nèi)的生物誘導分子(biological trigger),是在體內(nèi)許多疾病的生理作用上扮演了重要的角色,從到,再到,皆與之脫離不了關系,NF-kB發(fā)現(xiàn)與哺乳動物的細胞,平時結合與另一分子--IkB,IkB使得NF-kB分子失去生物活性,當一組啟動信號啟動NF-kB后,IkB脫離NF-kB,NF-kB恢復活性,進入細胞核。NF-kB位于TLR下游信號通路的樞紐位置,當細胞受到生物應激刺激后激活NF-kB,活化的NF-kB進入細胞核調節(jié)炎性細胞因子的表達,啟動針對病原微生物的固有免疫和獲得性免疫。所提供的elisa檢測試劑盒是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定elisa檢測試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經(jīng)過PBS或TBS的徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。
試劑配制:
1、大鼠核轉錄因子κB (NFκB)elisa檢測試劑盒說明書酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事項:
1. 大鼠核轉錄因子κB (NFκB)elisa檢測試劑盒說明書試劑盒使用前請保存在2-8℃。復溶后的標準品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬于正常現(xiàn)象,微加熱至40℃使結晶完全溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應終止液除外)。
5. 充分輕微混勻對反應結果尤為重要,zui好使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無微量振蕩器,可在反應孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標準品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液標本時,請按國家生物試驗室安全防護條列執(zhí)行。
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